通用型抗体稀释液（无蛋白） Ver.760656-1.0
● 货品规格：
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货号
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名称
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规格
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WU1090-100ml
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通用型抗体稀释液（无蛋白）
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100 ml
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WU1090-500ml
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500 ml
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● 产品简介：
本产品是最新一代的高效通用型抗体稀释液，添加了多种抗体保护剂，可以增加抗体的活性和稳定性，减少抗体的非特异性结合，提高实验的特异性和灵敏度，可用于稀释一抗（包括磷酸化抗体）和二抗，适用于 Western Blot，IHC 及 IF 等多种实验。试剂中不含有动物源蛋白，不含生物素，不会干扰基于生物素的检测，兼容辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（AP）和生物素（biotin）标记的二抗以及一抗的稀释。
按照每个抗体稀释10 ml计算，一个100 ml包装的通用型抗体稀释液可以稀释10个或10次抗体。
● 贮存、效期及运输：
4℃贮存；有效期一年；常温运输。
● 注意事项：
1 本产品不含有叠氮钠，可以用于HRP标记一抗和二抗的稀释。
2 为了能使抗体可以反复多次使用，建议尽量在4℃进行一抗和蛋白膜的结合反应，以减缓一抗的衰减速度。
● 使用说明：
直接用本品对抗体进行适当倍数的稀释。按照每次抗体稀释需要 10 ml 抗体稀释液计算，100 ml通用型抗体稀释液可稀释 10 次抗体。经本品处理后的抗体可回收于 4℃保存，多次重复使用，直至不能达到理想结果后丢弃。
● 实验示例：
1.Glut1抗体检测：
样品：Jurkat-RIPA-TP和K562-IP-TP样品均上样20 μg和10 μg，样品均95度 5 min；
凝胶：4-20%Bis-Tris预制胶，1×TMS 150V 43 min；
转膜：0.45 μm PVDF膜，1×RealBlot免冰浴快速湿转转膜液+10%乙醇（RT5040），四度预冷1小时，常温转膜，400 mA 40 min；
封闭：5分钟快速封闭液常温封闭5 min；
第一次检测：Glut1 兔多抗，Western一抗稀释液（基于BSA，WP1080）1：2000稀释，四度过夜孵育；二抗羊抗兔IgG-HRP（HGR1020） 1：5000 RT 60 min，ECL曝光2s600ms；
剥离：膜用快速抗体剥离液（免封闭）（WS1300）常温剥离20 min，不用封闭；
剥离后检测：Glut1兔多抗，通用型抗体稀释液（WU1090）1：2000稀释，四度过夜孵育；二抗羊抗兔IgG-HRP（HGR1020） 1：5000 RT 60min，ECL曝光1s480ms；
结论：与传统BSA抗体稀释液相比，通用型抗体稀释液能够降低非特异背景，提高Glut1抗体检测效果。
2. mTOR抗体检测：
样品：Jurkat-RIPA-TP和K562-IP-TP样品均95度 5min后上样20 μg和10 μg；
凝胶：4-20%Bis-Tris预制胶，1×TMS 150 V 43 min；
转膜：0.45μm PVDF膜，1×RealBlot 免冰浴快速湿转转膜液(RT5040)+10%乙醇，四度预冷1小时，常温转膜，不冰浴，400mA 40 min；
封闭：5分钟快速封闭液常温封闭5 min；
第一次检测：
一抗：mTOR RmAb 1：1000，通用型抗体稀释液（WU1090）稀释，四度孵育2 h；
二抗：HRP标记羊抗兔IgG（HGR1020） 1：5000 RT孵育60 min；
检测：RealECL发光液（EC2520）检测，曝光1 s 640 ms；
剥离：膜用快速抗体剥离液（免封闭）（WS1300），RT剥离20 min，不封闭；
第二次检测：
一抗：mTOR RmAb 1：1000，BSA抗体稀释液（WP1080）稀释，四度孵育2 h；
二抗：HRP标记羊抗兔IgG（HGR1020），1：5000 RT孵育60 min；
检测：RealECL发光液（EC2520）检测，曝光3 s和1 min；
结果：WU1090 稀释抗体曝光不到2s能检测到mTOR，而BSA稀释的抗体需要曝光1min可以检测到条带，可以说明通用型抗体稀释液明显增强了mTOR抗体的Western blot检测信号。