300 bp DNA Ladder
● 产品编号及规格：
RTM413-02 100次 (2×250μl)
本产品是由9条精准定量的带状双链DNA条带组成，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。本产品为即用型产品，已含有1×loading buffer，可根据实验需要，直接取2-5 μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。 本产品中9条带为300，600，900，1200，
1500，1800，2500，3000，5000 bp，其中1500 bp条带为100 ng/5 μl，其余条带浓度为50 ng/5 μl。
● 贮存、运输及效期：
4℃贮存3个月， -20℃长期贮存；常温运输。
●
使用方法：
1. 取2-5 μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中（每1 mm×1 mm加样孔加1 μl，如果加样孔宽于
5 mm，可以适当增加上样量）就行电泳。
2. 建议电泳条件:凝胶浓度为1％，凝胶长度8-10cm，电泳电压4-10 v/cm，电泳时间30-35分钟。
3. 通过核酸染料染色后紫外灯或蓝光仪下观察条带。
● 注意事项：
1.
琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。由于PAGE电泳的特殊性，该产品不建议用于PAGE电泳。
2.
使用与电泳缓冲液一致的缓冲液融化琼脂糖,例如使用1×TAE缓冲液电泳,需使用1×TAE缓冲液溶胶。
3.
尽量每次使用新鲜配制的电泳缓冲液。多次电泳后缓冲液电导增强，相同电压下电流增大，导致分辨率降低，并且明显产热，严重时会引起凝胶熔化或DNA变性。
4.
推荐使用RealSafe系列染料（货号：GR002，GR003，GR004）染色。如果使用Goldview或EB等染料进行染色，由于此类染料带更多的正电荷（染料移动方向与核酸泳动方向相反），随着电泳时间延长，染料向大片段聚集，凝胶会出现阴阳胶现象（染料含量高的凝胶紫外下较亮，含量低的凝胶紫外下发暗），导致小分子量DNA显色很弱或不可见。阴阳胶可以在电泳结束后浸泡染色，将胶浸没在含1 μg /ml EB或Goldview的电泳缓冲液中20-25 min，小分子量DNA会显色清楚。更长时间浸泡会因DNA分子扩散而使条带弥散，小分子量DNA更易弥散。
5. 紫外照射下EB易分解，使DNA条带荧光变浅。DNA受紫外光照射形成嘧啶二聚体，不利于待回收片段的下游工作，因此尽可能减少紫外照射时间。
6. 蔗糖会结合DNA，降低其电泳迁移率，建议DNA样品上样使用含甘油的Loading
Buffer。
7. 大部分核酸工具酶会结合DNA，降低其电泳迁移率，大分子量DNA尤为明显。
●
附录：
DNA在琼脂糖凝胶中的有效分离范围
|
琼脂糖浓度%（w/v）
|
双链DNA有效分离范围（bp）
|
优选电泳缓冲液
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示踪染料相当于双链DNA片段粗略大小(bp)
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溴酚蓝
|
二甲苯菁
|
|
TBE
|
TAE
|
TBE
|
TAE
|
|
0.5
|
2000-50000
|
1×TAE
|
750
|
1150
|
13000
|
16700
|
|
0.8
|
800-10000
|
1×TAE
|
320
|
530
|
4830
|
6500
|
|
1.0
|
400-8000
|
1×TAE
|
220
|
370
|
3030
|
4160
|
|
1.2
|
300-7000
|
1×TAE/0.5×TBE
|
160
|
275
|
2070
|
2890
|
|
1.5
|
200-3000
|
1×TAE/0.5×TBE
|
110
|
190
|
1300
|
1840
|
|
2.0
|
100-2000
|
0.5×TBE
|
65
|
120
|
710
|
1040
|
|
3.0
|
25-1000
|
0.5×TBE
|
30
|
60
|
300
|
460
|