三色预染宽分子量蛋白Marker(Phos-tag专用) Ver.760866-1.0
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货号
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名称
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规格
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RTD6166
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三色预染宽分子量蛋白Marker(Phos-tag专用)
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20次(100 μl)
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● 储存、运输及效期:
-20℃保存;湿冰运输;有效期1年。
● 贮存缓冲液:
62.5 mM Tris, pH7.5, 2 % (w/v) SDS, 33 %
(w/v) Glycerol, 5 mM DTT。
● 产品简介:
本产品包含10种纯化的预染蛋白质组成,分子量范围为10-180
kD,其中70
kD条带为红色,10
kD条带为绿色,其余条带为蓝色,可以用于SDS-PAGE和Western Blot转膜时确定未知蛋白的分子量。由于常规预染Marker在Phos-tag凝胶电泳中会出现弯曲的现象,该产品经过特殊处理,可有效改善预染
Marker条带的变形弯曲。Phos-tag是一种能与磷酸分子特异性结合的双核金属络合物,用于分离和检测磷酸化蛋白。在常规SDS-PAGE凝胶中加入Phos-tag 和二价金属离子(Mn2+或 Zn2+)即可分离不同条带中的磷酸化和非磷酸化蛋白。 在电泳时,固定在凝胶上的
Phos-tag 复合物可以特异性结合磷酸化蛋白,使得磷酸化蛋白电泳迁移率降低,从而实现磷酸化和非磷酸化蛋白的分离。
注: 在
Phos-tag SDS-PAGE 中,蛋白质分子的迁移率不仅与分子量大小有关,
与蛋白的磷酸化水平也是密切相关的。本产品不能作为蛋白质分子量大小的准确参考, 仅在电泳和转膜过程中起到指示作用。
以每次上样5 μl计算,该产品可以使用10次。
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技术规格
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条带数量
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7条
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浓度
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0.1-0.3 μg/μl
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上样前处理
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溶化后直接上样,不要加热处理
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推荐凝胶体系
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Zn-Phos-tag(Bis-Tris)或Mn-Phos-tag(Tris-Gly)
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推荐上样体积
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3-5 μl(1 mm厚度10齿梳子)
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推荐染色方法
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预染Marker,电泳过程中即可见条带;
电泳结束后可以考马斯亮蓝染色
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不适用于非变性电泳
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为变性Marker,不适用于非变性电泳
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● 使用说明:
1. 第一次收到该产品,常温溶化彻底混匀,离心快甩10秒将溶液完全收集到管底,-20℃贮存;
2. 使用该产品时,常温解冻后轻轻混匀后既能使用,不能95℃加热处理。
● 实验示例:
凝胶:8%Zn-Phos-tag
SDS-PAGE
使用Phos-tag磷酸化检测PAGE凝胶配制及电泳试剂盒(Bis-Tris)(RTD5101)制备,凝胶中Phos-tag 50 μM,ZnCl2 100 μM;
电泳:1×Tris-MOPS-SDS电泳缓冲液(TM1270P)(不含EDTA,加抗氧化剂(TA1510),80 V至分离胶上沿,
随后130 V至结束电泳,电泳时间55min;
结果:RTD6166
Marker电泳条带平直,不弯曲;RTD6108弯曲严重。