Anti-COX IV抗体（兔单抗）

Anti-COX IV Antibody（Monoclonal Antibody from Rabbit）

● 产品简介

注：WB, Western blot; IHC, Immunohistochemistry; IF, Immunofluorescence

COX IV抗体用经过适当修饰的人工合成COX IV一段多肽作为抗原制备而成的抗COX IV兔单克隆抗体。本抗体在Western blot或免疫染色时仅识别COX IV。COX IV抗体可用作线粒体蛋白上样量的内参。

真核细胞中的细胞色素C氧化酶(Cytochrome C Oxidase，简称COX)是一种异源寡聚酶，通常含有13个亚基，定位于线粒体内膜，是线粒体呼吸链的酶复合物，它可以从每4个还原性的细胞色素C得到一个电子，传递给一个氧分子，最终把一个氧分子转变成两个水分子。在此过程中细胞色素C氧化酶会结合4个质子用于产生2个水分子，同时把4个质子转移到膜的另外一侧产生质子梯度，即建立跨膜的电化学势，随后ATP合成酶可以利于该电化学势合成ATP。细胞色素C氧化酶中构成催化中心的3个最大的亚基由线粒体DNA编码，其余10个亚基包括COX IV由细胞核内的基因组DNA编码。细胞色素C氧化酶活性缺陷和人类多种疾病相关。

本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。

● 贮存形式：

1 mg/ml抗体溶于PBS，50%甘油，pH7.2。

● 保存及运输条件：

-20℃保存，一年有效；避免反复冻融；湿冰运输。

● 使用说明：

1. Western Blot杂交(ECL显色)：1:1000-3000稀释，常温孵育1-2 h或4℃过夜。

2. 免疫荧光（IF）和免疫组化（IHC）：1:200-1000稀释。

●  实验示例：

小鼠肾脏组织线粒体COX IV检测

样品：小鼠肾脏组织用动物线粒体提取试剂盒（组织样品）（RTD8116）提取，3K和12K表示3000 g和12000 g离心力收集线粒体沉淀； CY为提取上清-胞浆蛋白；Mt为提取线粒体蛋白；用1×Laemmli 上样缓冲液溶解CY和Mt蛋白，50度加热10 min后上样，上样量为5 μg和10 μg；

凝胶：RealPAGE类梯度PAGE凝胶快速电泳试剂盒（RTD6165）制胶，恒压200V 35 min；

转膜：0.45 μm NC膜，1×RealBlot湿转 400 mA 35min；

封闭：快速封闭液 RT 10 min；

一抗：COX IV兔单抗 1:3000 RT孵育1小时；

二抗：羊抗兔IgG-HRP（货号：HGM1020） 1:5000  RT 60min；

检测：RealECL发光液（货号：EC2520）自动曝光1秒。